Ventouse et polyarthrite rhumatoïde : Analyse protéomique des exosomes du liquide corporel de patients

Titre de la publication scientifique (en anglais) :

Proteomics analysis of body fluid exosomes of rheumatoid arthritis patients underwent oxhorn cupping therapy

Titre de la publication scientifique (en français) :

Analyse protéomique des exosomes du liquide corporel de patients atteints de polyarthrite rhumatoïde ayant subi une thérapie par ventouses en corne de bœuf

Quelques définitions :

Analyse protéomique : L’analyse protéomique permet d’identifier, de caractériser et de quantifier les protéines présentes dans un échantillon biologique à un moment donné

Exosomes : Les exosomes sont de petites vésicules membranaires (30 à 90 nm) libérées par les cellules dans leur environnement. Ils contiennent un échantillon d’ADN, d’ARN et de protéines de leur cellule d’origine, y compris des marqueurs de surface cellulaire. Les exosomes jouent un rôle important dans la communication intercellulaire et sont impliqués dans divers processus biologiques.

Polyarthrite rhumatoïde : La polyarthrite rhumatoïde (PR) est une maladie auto-immune inflammatoire chronique qui affecte principalement les articulations. Elle se caractérise par une inflammation symétrique des articulations, causant douleur, gonflement et raideur. Sans traitement, elle peut entraîner des déformations et des destructions articulaires, et peut également affecter d’autres organes comme le cœur et les poumons

Résumé court :

Cette étude analyse l’effet de la thérapie par ventouses en corne de bœuf (OHCT) sur la polyarthrite rhumatoïde (PR) en utilisant une analyse protéomique. Les chercheurs ont isolé des exosomes du liquide corporel de patients atteints de PR avant, pendant et après l’OHCT. Ils ont identifié 300 protéines différentiellement exprimées (DEP) entre les stades pré-traitement et post-traitement. L’analyse d’enrichissement GO et KEGG a révélé que les DEP étaient fortement liées à la liaison des protéines, à l’adhésion focale, à la région extracellulaire, aux exosomes et aux vésicules. L’étude suggère que l’OHCT pourrait réguler de multiples cibles et voies pour soulager la PR, ouvrant de nouvelles perspectives pour le traitement de cette maladie auto-immune.

Résumé long :

Cette publication scientifique explore les mécanismes d’action de la thérapie par ventouses en corne de bœuf (OHCT) dans le traitement de la polyarthrite rhumatoïde (PR). La PR est une maladie auto-immune inflammatoire chronique qui affecte principalement les articulations, causant douleur, raideur et limitations fonctionnelles. L’OHCT est une thérapie traditionnelle de la médecine mongole, mais ses mécanismes d’action restent encore mal compris.

Objectifs :

L’étude vise à comprendre les mécanismes multicibles de l’OHCT dans le traitement de la PR en utilisant une analyse protéomique. Les chercheurs ont cherché à identifier les protéines différentiellement exprimées (DEP) dans les exosomes du liquide corporel des patients atteints de PR avant, pendant et après l’OHCT, et à explorer les voies biologiques impliquées dans l’effet thérapeutique de l’OHCT.

Méthodologie :

Trente patients atteints de PR ont subi une OHCT et le liquide corporel accumulé dans les ventouses a été collecté. Les exosomes du liquide corporel ont été isolés et caractérisés par microscopie électronique en transmission (MET), analyse de la taille des particules, marquage fluorescent et détection par cytométrie en flux. L’analyse protéomique quantitative sans marquage a été utilisée pour détecter les DEP. Des analyses bio-informatiques ont été réalisées en utilisant la base de données KEGG, l’enrichissement GO, les groupes orthologues (COG) et le réseau d’interaction protéine-protéine (PPI). Enfin, un test ELISA a été utilisé pour détecter les cibles clés régulées par l’OHCT.

Résultats :

• Les images MET ont révélé que la taille moyenne des exosomes dans le liquide corporel des patients atteints de PR ayant subi une OHCT était de 76,13 nm. [1]
• Les taux positifs de CD9, CD63 et CD81 ont été détectés à la surface des exosomes du liquide corporel. [1]
• Un total de 300 DEP (58 régulées à l’haut et 242 régulées à la baisse) ont été identifiées entre les stades pré-traitement et post-traitement. [1]
• Les DEP étaient principalement liées à la liaison des protéines, à l’adhésion focale, à la région extracellulaire, à la modification post-traductionnelle et à la transduction du signal. [1]
• L’analyse des voies KEGG a montré un enrichissement significatif des DEP dans la voie de signalisation PI3K-Akt et l’adhésion focale. [2]
• Dix DEG (ITGA5, ITGA4, ENG, MMP14, SERPINH1, THY1, TAGLN, ITGA1, IGF1 et ITGB5) ont été considérées comme des gènes cibles selon l’analyse du réseau PPI. [2]
• Le test ELISA a montré une légère diminution des taux sériques de CDK1, ITGA5, ITGB5 et CD44 pendant et après le traitement. [2]

Implications cliniques : L’étude suggère que l’OHCT pourrait exercer des effets thérapeutiques sur la PR en modulant de multiples voies de signalisation et protéines cibles. Les résultats fournissent des informations précieuses sur les mécanismes moléculaires sous-dessous de l’OHCT, ce qui pourrait ouvrir la voie à de nouvelles stratégies thérapeutiques pour le traitement de la PR.

Protocole utilisé :

Le protocole expérimental de l’étude comprend les étapes suivantes :

1. Recrutement des sujets: Des patients atteints de PR ont été recrutés selon des critères d’inclusion et d’exclusion spécifiques.
2. Thérapie par ventouses en corne de bœuf: L’OHCT a été appliquée sur les zones douloureuses et les sites lésionnels, la durée et le nombre de séances étant ajustés en fonction de l’état du patient.
3. Collecte du liquide corporel et isolation des exosomes: Le liquide corporel accumulé dans les ventouses a été collecté et centrifugé à différentes vitesses pour isoler les exosomes.
4. Caractérisation des exosomes: Les exosomes ont été caractérisés par MET, analyse de la taille des particules et cytométrie en flux.
5. Analyse protéomique quantitative sans marquage : Les protéines des exosomes ont été analysées par spectrométrie de masse pour identifier les DEP.
6. Analyse bio-informatique : L’enrichissement GO, l’analyse des voies KEGG, la classification COG et l’analyse du réseau PPI ont été utilisés pour explorer les fonctions et les voies biologiques des DEP.
7. Détection des DEP dans le sérum par ELISA : Les niveaux de protéines clés dans le sérum ont été mesurés par ELISA pour valider les résultats de l’analyse protéomique.

Conclusions :

Les auteurs concluent que le liquide corporel extrait des patients atteints de PR traités par ventouses en corne de bœuf contient des exosomes. L’OHCT pourrait exercer des effets thérapeutiques sur la PR en régulant de multiples voies de signalisation et protéines cibles.

Ces conclusions suggèrent que l’OHCT pourrait être une thérapie complémentaire prometteuse pour le traitement de la PR. En ciblant des voies spécifiques et des protéines impliquées dans la pathogénie de la PR, l’OHCT pourrait aider à réduire l’inflammation, la douleur et les dommages articulaires.

Informations supplémentaires :

• Auteurs : Du Leng, Chimedragchaa Chimedtseren, Tegexibaiyin Wang, Ruga Su, Saren Bao, Xiele Mo, Xigesaiyin Ge, Suna Cha, Runtulaguer Xi, Saqila Wu, RenGaoWa Sa, Jiaqi Zhao, Ren Na, Perenlei Molor-Erdene.
• Pays d’origine : Chine, Mongolie
• Date de publication : 12 décembre 2024
• Citation de la source : Leng D, Chimedtseren C, Wang T, Su R, Bao S, Mo X, et al. (2024) Proteomics analysis of body fluid exosomes of rheumatoid arthritis patients underwent oxhorn cupping therapy. PLoS ONE 19(12): e0311526. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0311526